Liyofilizatsiyalangan amebosit lizati (LAL reagenti) orqali endotoksin sinovini tahlil qilish

Liyofilizatsiyalangan amebosit lizati (LAL reagenti) orqali endotoksin sinovini tahlil qilish

LAL reaktivlari: Liyofilizatsiyalangan amebotsit lizat (LAL) - Atlantika taqa qisqichbaqasidan olingan qon hujayralarining (amebotsitlar) suvli ekstrakti.
TAL reagentlari: TAL reaktivi Tachypleus tridentatus qon hujayralarining suvli ekstraktidir.
Hozirgi vaqtda LAL/TAL reagentlarining asosiy ishlab chiqarilishi AQSh va Xitoydadir.

Jel pıhtı endotoksin sinovi, bu usul hali ham insonga qarshi dori vositalarining xavfsizlik talablarini qondirish uchun butun dunyoda asosiy ilovalar hisoblanadi.
HOZIRDA Bioendo gel laxtasi LAL reagentini ishlab chiqaradi va etkazib beradi, shu jumladan bitta sinovli shisha ampulalar va ko'p sinovli flakonlar.
https://www.bioendo.com/gel-clot-endotoksin-assay/ G01, GS44, G02, G17 va G52
Bu dori testida sifatli endotoksinlarni aniqlash uchun iqtisodiy yechimdir.Ayniqsa, WFI, API yoki tayyor dori vositalarida endotoksinlarni sinash uchun in'ektsion preparatlar yoki parenteral preparatlar uchun.Endotoksin testini tahlil qilish - bu operatsiya harakatlarining yuqori talabidir, to'g'ri qayta ishlashni ta'minlash uchun gel pıhtılarının tahlili bilan shug'ullanish uchun malakali operator kerak.

uchun to'liq yechimG52Endotoksin testi:
LAL reaktivi
Standart endotoksinni nazorat qilish
BET suv
Endotoksinsiz pipetka uchlari
Endotoksinsiz shisha quvurlar, shu jumladan suyultirish va reaktsiya naychalari.
Suv hammomini yoki quruq issiqlik inkubatorini tavsiya qilish uchun inkubatsiya asbobi.Barcha inkubatsiya qurilmalari haroratning aniqligini talab qiladi.
Barcha sarf materiallari endotoksinsiz daraja standartiga javob beradigan LAL tahliliga tegish uchun ”<0,005EU/ml” .
Eksperimental muhit endotoksinni aniqlash uchun mos bo'lishi kerak.

E'tibor bering:
Endotoksinni tekshirish uchun pipetka uchlari yoki ko'p teshikli plitalar kabi plastik sarf materiallari keng qo'llaniladi.Uyg'unlashtirilgan farmakopeyalar (USP/CP) har qanday plastik sarf materiallari va shisha naychalarda aniqlanishi mumkin bo'lgan endotoksindan xoli bo'lishi va bir xil darajada muhim, lekin ko'pincha e'tiborga olinmasligi kerak, ular aralashuvchi omillardan xoli bo'lishi kerak.

Namunadagi endotoksinlarni aniqlash uchun endotoksin testini qanday ishlatish kerak?
Avvalo, belgilangan lizat sezgirligini tasdiqlash uchun test o'tkazilishi kerak.Tasdiqlash uchun sezgirlik yorliq belgilari bilan bir xil.
Namunani tahlil qilish uchun interferentsiyadan oldingi endotoksin testini o'tkazing.
"Interferentsiya testi" ning to'liq endotoksin tahlilini ishlatish uchun.
Namunadagi endotoksinlar darajasini aniqlash uchun chegara testini o'tkazish.

Ishlatilganda lizatning yorliqli sezgirligini tasdiqlash uchun test o'tkaziladi, natija g'ayritabiiy, 2 Lamada jel hosil bo'lmaganmi?
Bakterial nazorat standart endotoksinini tayyorlash usuli to'g'ri yoki yo'qligini tekshiring.
Har bir suyultiruvchi uchun vorteks bilan aralashtirish talab qilinadi (batafsil ma'lumot uchun qo'llanmaga yoki nazorat standarti endotoksinining qo'shimchasiga qarang).
Lizat reaktivining nazorat standarti endotoksiniga mos kelishini tekshirish uchun.

Lizat reagentining doimiy harorat jarayoni uchun suv hammomi yoki quruq issiqlik inkubatoridan foydalanish tavsiya etiladi (masalan, inkubator yoki quruq quti samarali emas).
Inkubatsiya davrida suv hammomidagi suv muhiti statik va barqaror bo'lib, barcha tebranishlardan qochadi.
Suv oqimi pompasini o'chirish uchun suv hammomiga alohida e'tibor bering.

Natijaga qarab, termostatdan probirka yoki shisha ampulani muloyimlik bilan chiqarib oling, sekin 180 daraja aylantiring,
kolbadagi jel shakllanishi deformatsiyalanmaydi va sirg'alib ketmaydi, natija "+" signali bilan qayd etilgan;
jel shakllanishi hosil bo'lmaydi yoki jel pıhtı hosil bo'lgan bo'lsa ham, buzilmagan holda saqlanishi mumkin emas.
Devorning sirpanishi salbiy, natija "-" signali bilan qayd etilgan.
Tez gel pıhtı endotoksin sinovi to'plami gel pıhtı endotoksinini tekshirish usuliga tegishli.
Tez gel pıhtı endotoksin sinovida, namuna ijobiy nazorat jel hosil qilmaydi?
Birinchidan, lizat reagentlarini tekshirish uchun bakterial endotoksin sinov suvidan foydalaning, operatorlar va atrof-muhit qoidalarga javob berishiga ishonch hosil qiling;

Agar to'plam malakali bo'lsa, u holda namunaning ijobiy nazorati namunaning inhibitiv ta'siri tufayli jel shakllanishiga olib kelmaydi va namunani qayta ishlash va davolash kerak.
Namunani qayta ishlashning eng keng tarqalgan usuli bu suyultirishdir.